本作除了瑪利歐、路易吉和奇諾比奧，還新增了以朋友身份加入的「偷天兔」和「奇諾比珂」角色。
即使遇到敵人，可操作不會受傷的偷天兔或可變身成「奇諾比姬公主」的奇諾比珂。
 
　　並且收錄可供玩家完全體驗以路易吉為主角的《New 超級路易吉 U》
世界雖然和《New 超級瑪利歐兄弟 U》共通，但關卡是全新的。
橫向卷軸瑪利歐將以 2 倍遊戲的份量在 Nintendo Switch 上登場